两种GAD65片段与IL-4基因共表达DNA疫苗的构建与鉴定

• 作者: ZHOU Zhi-guang 周鹏程 孙意 张松 张翼 黄干
• 来源期刊: 中国糖尿病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 谷氨酸脱羧酶65 白细胞介素4 克隆 DNA疫苗 糖尿病,1型
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 501-504
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-6187.2008.08.018

摘要

目的 构建两种谷氨酸脱羧酶(GAD)65片段与白细胞介素4(IL-4)基因共表达DNA疫苗,并在体外COS-7细胞中对表达产物进行检测.方法 从GAD 65质粒中扩增出GAD190-315和GAD490-570两个片段的cDNA,Overlap法分别与hIL-2信号肽cDNA基因拼接,将拼接后的融合基因与IL-4基因依次克隆入双启动子真核表达载体pBudCE4.1中.重组子经酶切和测序鉴定后,脂质体转染COS-7细胞,Western blot法检测融合基因的表达,ELISA法检测IL-4表达.结果 核酸序列测定表明克隆的融合基因和IL-4基因序列与报告序列一致,开放阅读框正确,Western blot和ELISA显示在COS-7细胞中均可检测两个目的 基因的表达.结论 两种GAD 65片段与IL-4共表达DNA疫苗均成功构建,为1型糖尿病的预防研究提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张松	贵阳医学院附属医院内分泌科	12	50	4.0	6.0
2	张翼	贵阳医学院附属医院内分泌科	1	0	0.0	0.0