呼肠孤病毒3型S1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 冷雪梅 胡建华 谢建云 高诚
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 呼肠孤病毒3型 S1基因 原核表达 间接酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 582-586
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.4|R446.61
• 字数: 4689字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.07.007

摘要

采用RT-PCR方法从呼肠孤病毒3型(Reo-3)中扩增S1基因的主要抗原片段SR,并将其克隆到原核表达载体pQE-31中诱导表达,融合蛋白SR-δ1纯化后被用作包被抗原,建立了检测呼肠孤病毒3型抗体的间接ELISA.对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析的结果表明,表达蛋白SR-δ1的分子质量约为32 ku,具有很好的抗原性.建立的ELISA与鼠痘病毒、仙台病毒、小鼠肝炎病毒、小鼠肺炎病毒均无交叉试验,具有良好的特异性、重复性和敏感性,与国家实验动物检测中心的ELISA检测试剂盒的符合率为98.7%,证实该方法可用于Reo-3抗体的检测.