人TPO基因定点整合荷斯坦牛αs1-酪蛋白基因打靶载体构建

• 作者: 刘庆友 崔奎青 李海涛 石德顺
• 来源期刊: 广西农业生物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 血小板生成素 定点整合 αs1-酪蛋白 载体
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术专栏
• 页码范围: 93-98,114
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4364字
• 语种: 中文

摘要

应用LA-PCR的方法,从荷斯坦牛基因组中成功地扩增获得6.0 kb和1.78 kb两个基因片段,其中6.0 kb包括αs1-酪蛋白基因5'调控序列到第三内含子部分,1.78 kb包括αs1-酪蛋白基因第十二内含子到第十四内含子之间序列,作为打靶载体的同源臂;从新生儿血液基因组中扩增获得5.5 kb的血小板生成素(thrombopoietin,TPO)基因组序列,包括第一内含子部分序列到3'终止子后的序列.以水牛β-酪蛋白基因的5'调控区4.4 kb片段为启动子,以pLoxp质粒为打靶载体骨架,加上同源臂片段和目的基因TPO的片段,经多步酶切-连接-转化-筛选-鉴定基因重组过程,最终建成长达25 kb的人TPO基因定点整合荷斯坦牛αs1-酪蛋白基因打靶载体,PCR和酶切分析表明载体构建正确,为研制定点整合荷斯坦牛乳腺生物反应器莫定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石德顺	广西大学动物科学技术学院	241	1058	14.0	21.0
2	刘庆友	广西大学动物科学技术学院	54	200	7.0	11.0
3	李海涛	广西大学动物科学技术学院	6	29	3.0	5.0
4	崔奎青	广西大学动物科学技术学院	40	151	6.0	10.0