人白介素-2基因打靶载体的构建、转染及鉴定

• 作者: 崔易虹 曹斌云 杨明明 杨莎 王韵斐 陈秋菊
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人白介素-2 β-酪蛋白 基因打靶 乳腺生物反应器
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 页码范围: 82-87
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

为研究人白介素2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达，构建人白介素-2基因的山羊β-酪蛋白位点打靶载体。以质粒pBCI为模板扩增山羊β-酪蛋白上游2．5kb和下游3．5kb的序列作为5’和3’同源臂，将克隆得到的人白介素2基因和neo基因插入到2个同源臂之间，获得山羊β-酪蛋白基因打靶载体pBN153。利用脂质体将重组质粒转染奶山羊胎儿成纤维细胞进行G418筛选，并采用PCR和实时定量PCR方法对人白介紊-2基因在稳定株中的表达进行验证。检测结果表明，本试验构建的打靶裁体pBN153成功转染奶山羊胎儿成纤维细胞，将人白介素2基因成功整合至奶山羊胎儿成纤维细胞基因组中，为通过体细胞核移植法制备人白介素-2基因乳腺生物反应器的研究奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹斌云	西北农林科技大学动物科技学院	111	665	14.0	19.0
2	杨明明	西北农林科技大学动物科技学院	47	174	8.0	10.0
3	崔易虹	西北农林科技大学动物科技学院	8	15	3.0	3.0
4	陈秋菊	西北农林科技大学动物科技学院	5	6	1.0	2.0
5	王韵斐	西北农林科技大学动物科技学院	4	6	1.0	2.0
6	杨莎	西北农林科技大学动物科技学院	2	5	1.0	2.0