山羊β-乳球蛋白基因打靶载体的构建

• 作者: 徐晓彬 李倩 王爱华 胡林勇 陈华涛 靳亚平
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 基因打靶 乳腺生物反应器 β-乳球蛋白 α-乳白蛋白 山羊
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 2364-2370
• 分类号: S827
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.11.020

摘要

[目的]构建山羊β-乳球蛋白(BLG)基因打靶载体,以期用人乳白蛋白(hALA)基因的编码区置换山羊BLG基因的编码区,借助BLG的内源性调控序列指导hALA的表达.[方法]以山羊血液基因组为模板PCR扩增获得BLG基因的5'端侧翼序列(BLG5)、第5外显子和第5内含子的部分序列(E5)和3'端侧翼序列(BLG3),同时以人血液基因组为模板克隆了hALA基因的基因组序列(ALA),并将上述片段连接到克隆载体pMD18 T-simple或pBluescript KS(-),得到载体pB5T,pB3T,pAKS和pAEKS.对pB5T进行亚克隆,将BLG5连接到pAEKS中,构建载体pBAE;最后将BLG5-hALA-E5和BLG3分别连接到打靶载体ploxpII中,标记为pBAT.[结果]经酶切和/或测序等鉴定,以上载体均正确.[结论]构建得到了旨在将hALA定向插入到山羊乳蛋白基因座位的打靶载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李倩	西北农林科技大学动物医学院	20	170	4.0	13.0
2	靳亚平	西北农林科技大学动物医学院	73	447	12.0	18.0
3	王爱华	西北农林科技大学动物医学院	23	103	6.0	9.0
4	陈华涛	西北农林科技大学动物医学院	5	10	2.0	3.0
5	胡林勇	西北农林科技大学动物医学院	6	46	4.0	6.0
6	徐晓彬	西北农林科技大学动物医学院	2	5	1.0	2.0