小鼠性激素结合球蛋白条件基因打靶载体的构建

• 作者: 孙磊 王越 郑晋华 金镇
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 性激素结合球蛋白 条件性基因敲除 载体 Red/ET重组
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 203-208,213
• 页数: 7页
• 分类号: Q782|R394-33|R394.2
• 字数: 5131字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建小鼠性激素结合球蛋白（Shbg）条件基因打靶载体。方法运用ET克隆的方法构建Shbg基因第4?7号外显子两侧插入loxp位点的条件性剔除载体。首先以BAC DNA为模板克隆出Shbg及其上、下游基因并打靶质粒载体（pBR322?MK?AB），利用该质粒和BAC克隆，通过同源重组方式，获得套取质粒（pBR322?Shbg?Re）；再分别以PL452及PL451为模板扩增出含Neo片段，经过再一轮的Red/ET重组成功实现条件性基因敲除打靶载体（pBR322?MK?SHBG?cko）的构建。结果经多个限制性内切酶酶切鉴定和测序证实，构建的pBR322?MK?AB、pBR322?Shbg?Re、SHBG?Ln重组质粒和Shbg条件基因打靶载体（pBR322?MK?SHBG?cko）结构正确，与设计相符。结论成功构建了小鼠Shbg条件基因打靶载体，为后续Shbg基因条件敲除小鼠模型的构建奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金镇	中国医科大学附属盛京医院妇产科	65	515	11.0	21.0
2	王越	中国医科大学附属盛京医院妇产科	15	69	5.0	8.0
3	孙磊	中国医科大学附属盛京医院妇产科	23	83	5.0	8.0
4	郑晋华		4	3	1.0	1.0