小鼠釉基质丝氨酸蛋白酶基因打靶载体的构建及鉴定

• 作者: 姜秋 孙宏晨 欧阳红生 聂代邦 谢艳林
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 釉质丝氨酸蛋白酶 小鼠 基因敲除 打靶载体
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 977-980
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 2938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2006.06.010

摘要

目的:对牙釉质丝氨酸蛋白酶(EMSP1)基因进行体外扩增,构建基因打靶载体,利用基因打靶技术建立转基因动物模型,研究EMSP1生理功能和病理学意义.方法:根据EMSP1的DNA序列,采用Oligo 6.0软件设计两对引物,以129品系小鼠基因组DNA为模板,分别扩增长为5 000 bp和1 700 bp片段作为同源长短臂.将其分别插入通用型基因敲除载体pSSC-9的正向筛选基因neo两侧,用PCR方法、限制性酶切和DNA序列分析进行鉴定.结果:采用双酶切鉴定,阳性重组克隆分别切出5000 bp和1700 bp片段,表明长短臂已克隆于载体中.DNA序列分析表明,成功构建EMSP1基因打靶载体pSSC-9- EMSP1.结论:成功构建小鼠EMSP1基因打靶载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙宏晨	吉林大学口腔医院儿童牙病科	194	754	13.0	16.0
2	姜秋	吉林大学口腔医院儿童牙病科	25	69	4.0	8.0
3	欧阳红生	吉林大学畜牧兽医学院动物生物技术系	63	213	8.0	10.0
4	谢艳林		7	7	1.0	2.0
5	聂代邦	吉林大学畜牧兽医学院动物生物技术系	6	8	1.0	2.0