卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体的构建及鉴定

• 作者: 吴芳 姚楠 张万江 徐芳 曹旭东 田玺择 章乐 董江涛
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因敲除 基因打靶载体 Hsp16.3 卡介苗
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-13
• 页数: 6页
• 分类号: R372|Q782
• 字数: 3227字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体.方法 体外培养卡片介苗菌株并提取基因组DNA,扩增Hsp16.3基因两侧序列5′-Hsp16.3和3'-Hsp16.3,分别插入到pKO质粒载体预定位点中构建Hsp16.3基因置换型打靶载体,筛选并进行PCR、双酶切鉴定及测序鉴定.结果 构建的卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体,经PCR、双酶切鉴定及测序证实pKO质粒中的2个插入片段为所需目的基因.结论 成功构建出卡介苗菌株Hsp 16.3基因打靶载体.