结核分枝杆菌Hsp16.3的表达、纯化和鉴定

• 作者: 师长宏 张廷芬 张海 朱德生 白冰 赵勇
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Hsp16.3 休眠
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 964-967
• 页数: 4页
• 分类号: R378.9
• 字数: 3145字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.10.002

摘要

目的 克隆结核分枝杆菌hspx(acr、Rv2031c)基因,扩增后测序,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白Hsp16.3(Heat Shock Protein 16.3 ).方法 用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出hspx基因片段,连接进入pTA2载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pProEX HTb并在大肠杆菌DH5α中表达,表达蛋白SDS-PAGE分析后,分别与6×His mAb、16kDa mAb和结核病人血清进行Western-blot,最后用Ni-NTA进行亲和层析纯化蛋白.结果 获得结核分枝杆菌Hsp16.3蛋白基因,经序列测定与GenBank公布的序列完全一致;表达蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子质量与文献报道一致;Western-blot结果显示,在相对分子量约16kDa处有与6×His mAb和鼠抗16kDa mAb的特异性结合带,而与结核病人血清杂交没有出现结合带.表达产物为包涵体,通过Ni-NTA纯化系统,可得到纯化的目的蛋白.结论 成功地表达、纯化和鉴定了Hsp16.3蛋白,它有可能作为新型结核疫苗的靶抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	师长宏	第四军医大学实验动物研究中心	145	694	13.0	16.0
2	张海	第四军医大学实验动物研究中心	87	511	12.0	18.0
3	赵勇	第四军医大学实验动物研究中心	74	352	10.0	14.0
4	张廷芬	第四军医大学实验动物研究中心	9	38	4.0	6.0
5	白冰	第四军医大学实验动物研究中心	35	127	6.0	9.0
6	朱德生	第四军医大学实验动物研究中心	36	409	10.0	19.0