弓形虫膜抗原SAG3基因打靶载体的构建及筛选

• 作者: 王景圆 郑焕钦 钟兴明 陈观今 韦相才
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 膜抗原 SAG3 基因打靶 载体
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1045-1048,1061
• 页数: 5页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.12.007

摘要

目的构建弓形虫膜抗原SAG3基因打靶载体,建立基因敲除突变株,为进一步探讨SAG3功能和弓形虫侵入宿主细胞机制提供可行的研究方法.方法用基因克隆方法将 SAG3 1.53kb和 2.81kb 两个同源序列分别插入TUB5/CAT质粒中,构建置换型打靶载体,氯霉素乙酰转移酶( CAT) 抗性基因作为筛选标记,采用电转移转染细胞方法进行基因打靶,建立突变型的弓形虫株,采用PCR、酶切分析和Southern Blot 杂交方法筛选鉴定. 结果构建了弓形虫RH株5 'SAG3-TUB5/CAT-3 ' SAG3置换型载体,获得了敲除SAG3 基因的弓形虫突变株,建立基因敲除突变株,获得了阳性的筛选克隆,经鉴定证明基因打靶结果准确.结论通过构建基因打靶载体,可有目的地敲除弓形虫膜抗原基因,为进一步研究弓形虫侵入机制,探讨弓形虫病防治提供可行的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟兴明		83	472	12.0	17.0
2	韦相才		65	382	10.0	15.0
3	郑焕钦	中山大学中山医学院病原生物学部	25	151	7.0	11.0
4	陈观今	中山大学中山医学院病原生物学部	15	71	4.0	7.0
5	王景圆		1	7	1.0	1.0