监测活细胞中诱导激活的Rac、Cdc42时空图像的FRET单分子探针的构建

• 作者: 任道全 刘如石 孙斌 张青岩 邱义兰 郭向荣
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Rac1 Cdc42 FRET 单分子探针
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 技术研究
• 页码范围: 684-688
• 页数: 5页
• 分类号: Q784|Q785
• 字数: 3754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2008.05.021

摘要

以PCR方法从人脑cDNA基因文库扩增Rac1、Cdc42 cDNA全序列及其效应蛋白基因Pak1、N-WASP的GTP酶联结区域(GBD)序列,从dsRed1-N1质粒扩增红色荧光蛋白dsRed1cDNA全序列.将cDNA序列依次定向克隆至pECFP-N1质粒载体,获得基于FRET原理,包含dsRed1,Pak1或N-WASP的GBD,Rac1或Cdc42,ECFP编码序列的单分子探针.在dsRed1的C末端加入一段CAAM法尼基化基序,构建包含EGFP,Pak1的GBD,Rac1或Cdc42,dsRed1-CAAM的质膜特异表达的单分子探针.采用这两种探针,可用于监测活细胞中诱导激活的Rac1、Cdc42信号转导通路的3D时空图像,检测待测蛋白分子的GEF或GAP活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙斌	湖南师范大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
2	任道全	湖南师范大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
3	张青岩	湖南师范大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
4	邱义兰	湖南师范大学生命科学学院	23	124	7.0	10.0
5	刘如石	湖南师范大学生命科学学院	34	210	8.0	13.0
6	郭向荣	湖南师范大学生命科学学院	8	35	2.0	5.0