H1N1亚型猪流感病毒HA基因的表达及单克隆抗体的制备

• 作者: 冀君 张祥斌 曹永长 李少璃 毕英佐 谢青梅 马静云
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: H1N1亚型猪流感病毒 血凝素 高效可溶表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 962-967
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.5|Q786
• 字数: 5823字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.11.009

摘要

采用RT-PCR方法扩增了H1N1亚型猪流感病毒(SIV)广东株的血凝素(HA)基因,测序后对HA基因进行了生物信息学分析.将HA基因克隆到高效可溶表达载体pBCX上,成功构建重组表达质粒pBCX-HA.将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达.诱导表达的HA融合蛋白分子质量约为94.0 ku,表达产物占菌体总蛋白的29.5%.经Western-blot分析证实可溶表达的融合蛋白与H1N1亚型猪流感病毒阳性血清具有良好的免疫反应性.用纯化的HA融合蛋白作包被抗原用于猪流感病毒单克隆抗体的筛选,成功筛选到2株针对HA蛋白抗原表位的单克隆抗体;ELISA结果表明,制备的SIV单克隆抗体ⅢF6A4C10与H1N1亚型SIV抗原具有特异的免疫反应性,为H1N1 SIV的鉴别诊断奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕英佐	华南农业大学动物科学学院	216	2631	28.0	41.0
2	马静云	华南农业大学动物科学学院	87	548	13.0	19.0
3	谢青梅	华南农业大学动物科学学院	112	510	12.0	17.0
4	李少璃	华南农业大学动物科学学院	9	66	5.0	8.0
5	冀君	华南农业大学动物科学学院	13	85	5.0	8.0
6	曹永长	中山大学生命科学学院	27	90	5.0	7.0
7	张祥斌	华南农业大学动物科学学院	13	82	5.0	8.0