甜瓜蔗糖磷酸合成酶基因全克隆及工程载体的构建

• 作者: 何启伟 侯丽霞 焦自高 王崇启 董玉梅 赵双宜
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甜瓜 蔗糖磷酸合成酶 基因克隆 工程载体
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 548-551
• 页数: 4页
• 分类号: S652
• 字数: 2985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9980.2008.04.020

摘要

蔗糖磷酸合成酶在甜瓜果实蔗糖合成途径中起关键性的调节作用,克隆该基因并导入甜瓜低糖自交系,可改良甜瓜果实品质创新优良种质.从甜瓜幼苗叶片提取总RNA,利用RT-PCR与Southern blot方法相结合.重组子质粒经限制性内切酶酶切和PCR验证以及测序同源性比较,克隆到基因的5'(2 859 bp)和3'(852 bp).应用高保真Taq聚合酶PCR拼接蔗糖磷酸合成酶完整cDNA序列3 692 bp.该片段与GenBank中其它植物基因序列具有97％～99％的同源性,登录号DQ364058.应用BamH Ⅰ、Kpn,Ⅰ、Ggl Ⅱ限制性酶切获得植物双元表达载体pROK2及基因的线性片段,通过T4连接酶反应,构建了以CaMV35S为启动子,以Tnos为终止子的工程载体pROK-SIS.该载体含有Npt-Ⅱ选择标记基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯丽霞	山东省农业科学院蔬菜研究所	43	182	9.0	13.0
2	何启伟	山东省农业科学院蔬菜研究所	116	1776	22.0	38.0
3	焦自高	山东省农业科学院蔬菜研究所	112	830	16.0	27.0
4	王崇启	山东省农业科学院蔬菜研究所	70	520	13.0	21.0
5	董玉梅	山东省农业科学院蔬菜研究所	69	534	13.0	21.0
6	赵双宜	山东大学生命科学院	27	550	13.0	23.0