表达rhTNFR-Fc的CHO细胞的氨基酸代谢特征及氨基酸流加培养工艺研究

• 作者: 唐治华 应跃斌 江海燕 罗家立 陈枢青 黄敏芬
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白 CHO细胞 氨基酸 流加-批式 代谢
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 35-39
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.9
• 字数: 3252字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2008.01.009

摘要

为提高表达重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白(rhTNFR-Fc)的CHO工程细胞的培养密度和目的蛋白表达,研究了葡萄糖和谷氨酰胺流加-批式培养工艺的细胞氨基酸代谢特征及游离氨基酸和大豆蛋白水解物的补加策略.通过补加葡萄糖和谷氨酰胺浓缩液分别维持其浓度为10 mmol/L和2 mmol/L左右,在不同阶段定期补加特定的氨基酸浓缩液或大豆蛋白水解物补充氨基酸消耗,检测细胞培养上清中rhTNFR-Fc的表达.谷氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、脯氨酸等4种非必需氨基酸快速消耗,是CHO工程细胞增殖和目的蛋白表达的限制性底物.以游离氨基酸、游离氨基酸合并大豆蛋白水解物补充氨基酸消耗可分别使细胞生长密度提高50%、100%,目的蛋白表达增加60%、125%,培养时程延长44%、66%,同时葡萄糖比消耗率、乳酸比生成率降低,谷氨酰胺的利用效率提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈枢青	浙江大学药学院	80	249	8.0	11.0
2	罗家立		6	76	4.0	6.0
3	应跃斌	浙江大学药学院	7	23	2.0	4.0
4	唐治华	浙江大学药学院	2	8	1.0	2.0
5	江海燕		2	1	1.0	1.0
6	黄敏芬		1	1	1.0	1.0