曲古抑菌素A对腺样囊性癌细胞ACC-2增殖及p16INK4a启动子区甲基化、mRNA表达的影响

• 作者: 周晓健 周荣睿 李江 田臻 黄枫豪
• 来源期刊: 中国口腔颌面外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 唾液腺腺样囊性癌 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 曲古抑菌素A(TSA) p16INK4a DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 194-199
• 页数: 6页
• 分类号: R739.8
• 字数: 4951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3244.2008.03.008

摘要

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人唾液腺腺样囊性癌细胞ACC-2增殖的影响,并分析其对p16INK4a基因启动子区甲基化及mRNA表达的影响.方法:50～800nmol/L范围内不同浓度的TSA作用于体外培养的ACC-2细胞.采用MTT法检测细胞生长抑制率.观察细胞形态变化.应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)、反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和实时定量PCR(real-time PCR)分析不同时间(2、4、8、16、24h)100nmol/L TSA 处理前、后ACC-2细胞中p16INK4a基因启动子区甲基化及p16INK4amRNA表达的变化.采用SAS6.12软件包对数据进行t检验.结果:TSA在50nmol/L浓度即能有效抑制ACC-2细胞的增殖(P<0.05),并使细胞形态发生明显改变,抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性.100nmol/LTAA处理ACC-2细胞2～16h后,p16INK4a基因启动子区甲基化消失;处理2～24h后,p16INK4amRNA表达显著增高.结论:TSA可能通过改变组蛋白乙酰化的水平影响p16INK4a基因启动子区甲基化的水平,使p16INK4a基因表达升高,影响细胞周期,从而有效抑制ACC-2细胞的生长.