磺胺二甲氧嘧啶单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

• 作者: 侯玉泽 刘宣兵 刘庆堂 宋春美 张改平 杨小保 职爱民 邓瑞广 鲁晓翠
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 磺胺二甲氧嘧啶 单克隆抗体 免疫学特性
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 同位素示踪·植物生理·动物生理
• 页码范围: 739-744
• 页数: 6页
• 分类号: Q94
• 字数: 4141字
• 语种: 中文

摘要

用重氮化法将SDM(磺胺二甲氧嘧啶)偶联于载体蛋白BSA和OVA,合成免疫原BSA-SDM和包被原OVA-SDM,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE进行鉴定;用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌SDM mAb细胞株,用体内诱生腹水法制备SDM mAb;对SDM mAb的效价、亲和性、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定.结果表明,BSA-SDM人工抗原制备成功,分子结合比约为1:12.1;筛选出184、3D9、4E1共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:3.2×102、1:5.12×102、1:8.1×102,腹水分别为1:2.56×105、1:2.56x 105、1:5.12×105,4El亲和常数(Ka)为1.25×1010mL/mol;4E1株对SDM的IC50为16.64ng/ml,与磺胺-6-甲氧嘧啶交叉反应率为5%,与其他磺胺类药物无交叉反应性.本试验获得了抗SDM高价、敏感、特异的mAb,可用于SDM残留检测的免疫学试验.