磺胺母核单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究

• 作者: 吴国娟 吴国英 常迪 杜玉玲 王晶 陆彦
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 磺胺类药物 母核 单克隆抗体 免疫学特性 多残留检测
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 139-145
• 语种: 中文

摘要

制备磺胺母核(SH)单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb),并对其免疫学特性进行检测.方法:采用混合酸酐法将本实验室合成的磺胺类药物母核结构物(SH)偶联于牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上,合成免疫原BSA-SH和包被原OVA-SH,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE法进行鉴定.用BSA-SH免疫Balb/c小鼠,间接ELISA和间接竞争ELISA法筛选细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立SH mAb细胞株,用体内诱生腹水法制备SH mAb,对SH mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定.结果:BSA-SH人工抗原制备成功,SH与BSA的分子结合比约为11.6:1.筛选出5G1、5G2和8D2 3株敏感特异性的杂交瘤细瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1:6.40×102,1:1.28×103和1:3.20×102,腹水效价分别为1:2.56×105,1:5.12×105和1.28×105.5G2株对SH的半数抑制浓度(IC50)为82 ng/mL.纯化后抗体对磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺对甲氧嘧啶(SMD)、磺胺甲基嘧啶(SM)、磺胺间二甲氧嘧啶(SDM)、磺胺醋酰(SCT)、磺胺氯吡嗪钠(SCZ)、磺胺噻唑(ST)、磺胺甲噫唑(SMZ)、磺胺苯吡唑(SPH)、磺胺二甲嘧啶(SM2)、氨苯磺胺(SSF)和磺胺喹嗯啉(SQ)的交叉反应率分别为108％,86％,105％,85.6％,72％,26％,32％,54.6％,43％,4.6％,0.5％和76％.结论:通过试验获得了抗磺胺母核SH高效价、敏感、特异的mAb,为研制磺胺药多残留检测试剂盒和胶体金免疫层析试纸条奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴国娟	北京农学院动物科学技术学院	115	1400	22.0	33.0
2	陆彦	北京农学院动物科学技术学院	37	253	10.0	14.0
3	常迪	北京农学院动物科学技术学院	24	51	4.0	5.0
4	王晶	北京农学院动物科学技术学院	6	23	2.0	4.0
5	杜玉玲	新疆农业大学动物医学学院	4	6	1.0	2.0
7	吴国英		2	6	1.0	2.0