全人源抗Met双价抗体的制备与特性分析

• 作者: 唐奇 张大为 徐凛峰 曹伯良 朱进 管晓虹
• 来源期刊: 中华临床医师杂志(电子版)
• 学科: 医学
• 关键词: 抗肿瘤药 原癌基因蛋白质c-met 抗体 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1396-1402
• 页数: 7页
• 分类号: R3
• 字数: 2611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0785.2008.12.013

摘要

目的 以抗HGF受体Met特异性的全人抗体Fab基因为模板,合成并表达双价抗体Diabody.方法 以天然抗体库中筛选出的Fab基因为模板,分别扩增抗体的重链可变区与轻链可变区基因,经重叠拼接合成Diabody基因,克隆于原核表达载体pBAD/gⅢA中表达.在不同的培养条件下,阳性克隆经IPTG诱导表达,ELISA、SDS-PAGE、Western-blot和细胞免疫荧光分析.结果 培养基成分和诱导剂的浓度对目的 蛋白的表达未见有明显的影响,低温诱导能够促进可溶性蛋白的产生;但电泳与印迹分析表明,在29 kD出现预期大小蛋白条带.双价抗体经表达、变性与复性和IMAC亲和纯化后,用细胞免疫荧光分析表明,Diabody能够与S114细胞表达Met的胞外区特异性结合.结论 本研究制备的双价抗体能够与其抗原特异性结合,该抗体有望与其他抗体分子结合,制备双特异性抗体,为肿瘤临床诊断或治疗提供候选分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	管晓虹	南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室	58	333	10.0	15.0
2	朱进	南京军区军事医学研究所医药生物技术室	66	357	9.0	16.0
3	徐凛峰	南京医科大学第二附属医院普外科	10	90	5.0	9.0
4	唐奇	南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室	5	13	2.0	3.0
5	张大为	南京医科大学第二附属医院普外科	11	32	4.0	5.0
6	曹伯良	南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室	8	19	2.0	4.0