重组胰高糖素样肽-1融合蛋白的纯化及其活性测定

• 作者: 张文婷 张立操 张莲芬 王一君 窦文芳 金坚 陈其亮 陈蕴 雷楗勇
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰高糖素样肽-1 融合蛋白 纯化 活性测定
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 147-151
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 字数: 3590字
• 语种: 中文

摘要

主要探讨了发酵液中融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA的分离纯化过程.发酵上清液经超滤浓缩、离子交换层析、凝胶过滤分离得高纯度的th(GLP-1A2G)2-HSA.纯化样品经SDS-PAGE检测为单一条带,HPLC分析纯度达98%,125I标记后用TCA沉淀法测定放射性纯度达97%,符合药效学和药代动力学研究的需要.整个纯化过程回收率达到48.5%.通过细胞增殖实验表明纯化后的th(GLP-1A2G)2-HSA具有类似GLP-1的促胰岛β细胞增殖活性,说明该分离过程保护了融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA的生物活性.通过融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA的纯化方法,可获得高纯度的重组融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA,为进一步的药效学和药代动力学研究奠定了基础.