重组Klenow-HSA融合蛋白的构建、纯化及其稳定性

• 作者: 曾令娥 王露 白惠卿 范慧 黄大无 黄晶
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: DNA聚合酶 Ⅰ/生物合成 人血清白蛋白 重组融合蛋白质类/生物合成 DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 684-687
• 页数: 4页
• 分类号: TQ464.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2002.06.011

摘要

目的:提高Klenow酶的热稳定性和储藏稳定性.方法:利用PCR的方法扩增DH5α染色体DNA,构建编码Klenow和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中获得高效表达.分别对Klenow酶和Klenow-HSA融合蛋白进行纯化,并进行活性及稳定性的研究.结果:发现Klenow-HSA融合蛋白在大肠杆菌中呈可溶性表达.体外实验证实这种融合蛋白具有与Klenow聚合酶相同的活性,其稳定性明显提高.结论:融合蛋白确实能增加Klenow酶的热稳定性和储存稳定性,为研制新一代高稳定性Klenow酶提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王露	北京大学基础医学院免疫学系	7	25	3.0	4.0
2	黄大无	北京大学基础医学院免疫学系	5	25	3.0	5.0
3	范慧	北京大学基础医学院免疫学系	7	68	4.0	7.0
4	白惠卿	北京大学基础医学院免疫学系	16	203	8.0	14.0
5	黄晶	北京大学基础医学院免疫学系	4	28	3.0	4.0
6	曾令娥		1	4	1.0	1.0