应用荧光定量PCR方法研究RPL29基因在通城猪和长白猪不同时期胚胎骨骼肌中的表达

• 作者: 储明星 唐中林 张兴举 李勇 李奎 杨述林 牟玉莲 邓宏 马月辉
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 RPL29基因 荧光定量PCR 骨骼肌 表达分析
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1007-1012
• 页数: 6页
• 分类号: S828.2
• 字数: 4618字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.08.001

摘要

为了研究蛋白合成相关基因RPL29在骨骼肌发育中的作用,采用SYBR Green染料建立该基因的实时荧光定量PCR(QPCR)分析方法,并分析该基因在猪胚胎骨骼肌中的表达变化.以不同浓度稀释样本为标准品,建立标准曲线方程:Y=-3.303X+43.077(决定系数R2=0.999).分析表明:该方法具有较大的检验范围(PCR扩增Ct值13～35),很好的扩增效率为100%,熔解曲线显示产物特异的单峰,其Tm值为86.5℃.本研究以H3F3A基因为内参,用所建立的实时定量PCR方法,分析RPL29在妊娠33、65和90 d的通城猪和长白猪胚胎骨骼肌中的表达变化.研究发现:RPL29基因在通城猪和长白猪胚胎骨骼肌发育过程中分别呈现下调和上调表达模式;妊娠33 d时,通城猪中的表达水平高于长白,而妊娠90 d时在长白猪中高表达;妊娠65 d时两品种间无显著差异.结果显示RPL29基因可能与猪骨骼肌的生长发育有关,并可能影响产肉性状.