猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆及原核表达载体的构建

• 作者: 张春叶 李焕荣 沈红 路苹
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 S基因B、C抗原位点 克隆 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q782
• 字数: 3438字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2008.09.001

摘要

参考GenBank上公布的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点序列,应用Primer6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增B、C抗原位点目的片段,将扩增产物连接于peasy-T克隆载体上,构建克隆栽体,用Eco R Ⅰ和Xho Ⅰ对表达载体PET-32a(+)和重组质粒进行酶切,将酶切产物亚克隆至PET-32a(+)多克隆位点上,连接、转化至BL21(DE3),构建B、C位点的原核表达载体,并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定.所扩增的目的片段的大小为357 bp,与原核表达载体连接后,经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,说明成功地构建了TGEV S基因B、C抗原位点的原核表达载体.TGEV S基因B、C抗原位点原核表达载体的成功构建,为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈红	北京农学院动物科学技术系	67	545	12.0	21.0
2	李焕荣	北京农学院动物科学技术系	63	533	10.0	21.0
3	路苹		15	236	8.0	15.0
4	张春叶	北京农学院动物科学技术系	7	42	3.0	6.0