基因4型HEV上海株ORF2编码蛋白表达及其抗原性分析

• 作者: 侯加法 华修国 崔立 张文 杨志彪 沈权 牟静
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 ORF2 重组质粒 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 字数: 3361字
• 语种: 中文

摘要

为了表达基因4型戊型肝炎病毒(HEV)上海株ORF2编码蛋白并分析其抗原性,采用套式RT-PCR方法扩增上海猪基因4型HEV代表株结构蛋白基因ORF2部分片段,构建含有该基因片段的pET30a(+)重组表达质粒.命名为pET-E;将重组表达质粒转化大肠杆菌B121,经1mmol/L IPTG诱导得到表达,进行SDS-PAGE分析,然后用Western blot鉴定其抗原性,最后纯化蛋白.结果:SDS-PAGE证明该片段得到融合表达,分子量为33 ku.Western blot分析表明,重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性;该融合蛋白含有组氨酸标签,可以用MagExtractor-His-tag-kit进行纯化.用纯化的重组蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA检测89份猪血清样品,阳性率达80.4%,与已有的试剂盒检测结果相比,阳性符合率达95%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华修国	上海交通大学农业与生物学院	155	1291	18.0	27.0
2	侯加法	南京农业大学动物医学院	144	1082	17.0	25.0
3	张文	上海交通大学农业与生物学院	69	401	10.0	17.0
4	杨志彪	上海交通大学农业与生物学院	33	184	9.0	12.0
5	崔立	上海交通大学农业与生物学院	75	540	15.0	20.0
6	牟静	南京农业大学动物医学院	1	0	0.0	0.0
7	沈权	南京师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0