人成纤维细胞稳定转染的方法比较

• 作者: 智伟 李莉 芦小燕 解慧琪 邓力 陈晓禾
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人成纤维细胞 稳定转染 电转染 阳离子聚合物转染 阳离子脂质体转染
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 654-657
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 字数: 3386字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2008.04.035

摘要

目的 采用3种不同的方法将质粒pEGFP-N1,转染人成纤维细胞,从中寻找最佳的稳定转染的方法.方法 分别采用阳离子聚合物转染、阳离子脂质体转染和电转染方法,将能表达G418抗性蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞.24 h后,荧光显微镜下观察EGFP表达,流式细胞术测定瞬时转染率;通过G418筛选得到稳定转染的细胞.结果 电转染有最高的瞬时转染效率(56.8%),稳定转染得到的阳性克隆最多,且从细胞筛选到扩增至得到阳性大克隆所用的时间也最少(约20 d);用阳离子聚合物瞬时转染率低(1.7%),稳定筛选同样可以得到阳性大克隆,但是数量很少且从细胞筛选到扩增至阳性大克隆所用的时间也最多(约30 d);阳离子脂质体转染效果居中,瞬时转染率为39.9%,从细胞筛选到扩增至得到阳性大克隆所用的时间约25 d.结论 用电转染法将质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞是最佳的转染方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晓禾	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室	18	197	8.0	14.0
2	李莉	四川大学华西药学院药理系	109	548	12.0	18.0
3	解慧琪	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室	39	288	9.0	16.0
4	邓力	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室	36	261	9.0	15.0
5	智伟	四川大学华西药学院药理系	6	36	3.0	6.0
6	芦小燕	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室	2	17	1.0	2.0