乙脑病毒E蛋白中和表位与结核杆菌hsp70 在大肠杆菌中的融合表达

• 作者: 刘佩红 孙泉云 徐锋 沈莉萍 王建 葛菲菲
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乙脑病毒E蛋白中和表位 大肠杆菌 结核杆菌hsp70 融合 包含体
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 208-212
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S852.6
• 字数: 3627字
• 语种: 中文

摘要

根据大肠杆菌偏嗜性密码子原则,人工合成了乙脑病毒E蛋白C末端的中和表位,位于E蛋白上373～399 aa,通过Eco RⅠ和HindⅢ连接构建原核表达载体pET-32a-epitope.将hsp70通过HindⅢ和Xho Ⅰ连接到载体pET-32a-epitope上中和表位的3端,构建融合表达载体pet-32a-epitope-hsp70.诱导表达后,将上清和沉淀分别进行SDS-PAGE,结果表明该融合蛋白以包含体形式存在.将包含体在8 mol/L的尿素中过夜溶解,然后将上清过柱,获得良好的纯化结果.融合蛋白的分子量为94 kD.Western blot显示该蛋白兼具对JEV和结核杆菌热休克蛋白70(M.T hsp70)的特异抗原性.