酵母双杂交技术筛选肺癌组织中MCM7蛋白结合蛋白

• 作者: 刘俊 唐娜 官忠燕 段红梅 韩昱晨 韩艳玲
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 酵母双杂交 肺肿瘤 MCM7
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 509-512
• 页数: 4页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3208字
• 语种: 中文

摘要

背景与目的 微小染色体维持蛋白(mini-chromosome maintenance proteins,MCM)MCM7为MCM复合体成员之一,在启动DNA复制、合成中起关键作用,但对能够与其结合的蛋白所知甚少.本研究应用酵母双杂交方法筛选肺癌组织中MCM7蛋白的结合蛋白.方法构建MCM7全长cDNA-pGBKT7质粒,与含肺癌组织cDNA文库-pACT2质粒转化酵母AH109,在涂有X-a-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长,挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒,转化大肠杆菌提取质粒DNA后测序,进行生物信息学分析.结果 筛选出11种与MCM7蛋白特异性相互作用的蛋白,其中细胞骨架蛋白5种,各种酶、激酶以及相关受体6种.结论 克隆到的基因对进一步研究MCM7蛋白的功能有一定提示作用.