细胞裂解液对蛋白质定量方法的影响

• 作者: 刘黎明 徐珊珊 曾群力 阎春兰
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质组学 蛋白质类/分析 电泳,凝胶,双向 血清白蛋白,牛
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 45-50
• 页数: 6页
• 分类号: R446
• 字数: 4204字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2008.01.009

摘要

目的:观察不同细胞裂解液对Bradford法和bicinchoninic acid(BCA)法的影响,以确定适合蛋白质组学研究中细胞全蛋白含量的定量方法.方法:采用Bradford法和BCA法测定牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)样品溶液,样品BSA溶液分别由双蒸水和不同裂解液(荧光差异双向凝胶电泳裂解液、三种传统双向凝胶电泳裂解液)配制;然后,采用这两种方法测定上述裂解液所提取的细胞全蛋白样品;采用Bradford法定量反复冻融、不同比色杯和不同时期标准曲线下的样品.结果:各细胞裂解液对Bradford法均有显著性影响,使所定量的BSA浓度普遍偏高1.2至2倍,但定量值可随着加样浓度的增加而增加(r=0.989～0.996,P<0.05);各裂解液对BCA法也均有显著性的干扰,多数定量结果超出仪器读数范围;对于同批全蛋白溶液样品,BCA法的定量结果与Bradford法相比可有千倍差异;反复冻融后蛋白浓度变化统计学上无显著性差异,但有下降趋势,不同比色杯和不同时期标准曲线对Bradford法无显著影响.结论:Bradford法是蛋白质组学中细胞全蛋白定量的较适方法,但需根据具体实验进行优化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾群力	浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点实验室	22	334	9.0	18.0
2	徐珊珊	浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点实验室	9	68	4.0	8.0
3	阎春兰	浙江大学医学院毒理学教研室	2	36	2.0	2.0
4	刘黎明	浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点实验室	1	27	1.0	1.0