绵羊黏膜趋化因子CCL28基因的克隆、序列分析与原核表达

• 作者: 乔新安 朱彦彩 李宏基 杨国宇 王月影 王艳玲 韩立强
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 黏膜相关上皮趋化因子 分子克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 842-847
• 页数: 6页
• 分类号: Q786|S852.4
• 字数: 4143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.06.028

摘要

利用同源序列克隆原理设计1对克隆引物,从绵羊结肠黏膜组织提取mRNA,通过RT-PCR获得CCL28基因,将PCR产物克隆、测序,并进行序列分析;再根据克隆的序列设计1对表达引物,用PCR法从重组克隆载体中扩增出含BamH Ⅰ/Xho Ⅰ酶切位点的CCL28片段,双酶切后亚克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达载体pGEX-CCL28,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导进行表达,SDS-PAGE鉴定.克隆的绵羊CCL28基因包含完整的开放阅读框,克隆片段长444 bp,ORF为387 bp,编码129个氨基酸,与人、小鼠、猪、牛该基因的同源性分别为76.4%、61.4%、84.3%和92.9%,推测的氨基酸序列与人、小鼠、猪、牛的同源性分别为76%、63%、84%和93%,表达的融合蛋白分子量约为39 ku,并以包涵体形式存在.为下一步研究绵羊CCL28的生物学功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艳玲	河南农业大学动物生理生化实验室	146	1533	22.0	32.0
2	杨国宇	河南农业大学动物生理生化实验室	174	1205	16.0	28.0
3	李宏基	河南农业大学动物生理生化实验室	58	534	8.0	22.0
4	王月影	河南农业大学动物生理生化实验室	111	590	13.0	19.0
5	韩立强	河南农业大学动物生理生化实验室	114	497	11.0	15.0
6	乔新安	河南农业大学动物生理生化实验室	23	50	5.0	6.0
7	朱彦彩	河南科技学院细胞工程重点实验室	13	25	3.0	4.0