17-AAG对人RPE细胞PDGFR和EGFR基因表达的调控

• 作者: 刘庆淮 姚家奇 李建民 王强 许志洋
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SYBR Green 实时荧光PCR 17-AAG 视网膜色素上皮细胞 增生性玻璃体视网膜病变 热休克蛋白90
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 2431-2434
• 页数: 4页
• 分类号: R77
• 字数: 3311字
• 语种: 中文

摘要

目的:通过检测17-AAG对人RPE细胞不同处理条件下mRNA的SYBR Green实时PCR方法,观察17-AAG对人RPE细胞中PDGFR和EGFR基因表达的调控.方法:体外培养人RPE细胞株.当加入17-AAG并作用0,2,5,10μmol/L及0,16,24,48h后,收集细胞,抽提RNA进行反转录.同时根据PDGFR、EGFR的基因序列,设计PDGFR、EGFR的引物,利用ABI 7300PCR仪和SYBRGreen,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct值进行基因表达的相对定量分析.结果:熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证明了PCR反应的特异性;相对定量结果显示,17-AAG可以下调PDGFR基因的表达(P<0.05),上调EGFR基因表达(P<0.05).结论:SYBR Green实时荧光PCR可特异、准确地分析RPE细胞相关增殖基因表达差异,为系统研究17-AAG治疗PVR的复杂调控机制创造有力条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李建民	南京医科大学中心实验室	30	187	4.0	13.0
2	王强	南京医科大学附属医院常州第二医院消化内科	73	336	10.0	16.0
3	许志洋	南京医科大学细胞生物学系	11	56	5.0	7.0