摘要:
目的:研究热休克蛋白(heat shock protein 90,Hsp90)抑制剂17-AAG对缺氧诱导的视网膜色素上皮( retinal pigment epithelial,RPE)细胞整联蛋白连接激酶( integrin - linked kinase,ILK)表达的影响。<br> 方法:利用200μmol/L氯化钴( cobalt chloride, CoCl2)建立体外RPE细胞的化学缺氧模型。不同浓度的Hsp90抑制剂17-AAG预处理RPE细胞1 h后给予12 h缺氧处理。实验分为缺氧对照组、二甲基亚砜( DMSO)对照组和17-AAG预处理组。其中17-AAG预处理组根据浓度不同又分为6组:0.01,0.10,0.50,1.00,5.00,10.00μmol/L。应用RT-PCR和Western blot 方法检测ILK表达变化情况。<br> 结果:缺氧对照组、DMSO对照组和17-AAG预处理组ILK mRNA与内参β-actin mRNA 光密度比值分别为1.32依0.04,1.29依0.03,0.93依0.06,0.70依0.05,0.53依0.03,0.44依0.04,0.32依0.04,0.30依0.03;ILK 蛋白与内参β-actin蛋白光密度比值分别为2.16依0.04,2.13依0.04,1.65依0.04,1.13依0.05,0.74依0.03,0.41依0.06,0.35依0.04,0.35依0.03。与缺氧对照组比较,17-AAG预处理组ILK mRNA和蛋白的表达明显降低( P<0.05),呈浓度依赖性。<br> 结论:Hsp90抑制剂17-AAG能够降低缺氧条件下RPE细胞ILK的表达。