pVAX1-microdystrophin重组质粒的构建及其治疗Duchenne型肌营养不良症的初步研究

• 作者: 于美娟 刘正山 周畅 张成 熊符 肖少波 许勇峰 郑卉
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小dystrophin基因 重组质粒 Duchenne型肌营养不良症
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 624-628
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 4486字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1003-9406.2008.06.003

摘要

目的 构建含有人microdystrophin基因的重组质粒,体内、外研究其表达,为进一步应用此重组质粒来研究电转、静脉、动脉注射或加入其它基因来增强microdystrophin基因的表达等方法对Duchenne型肌营养不良(Duchenile muscular dystrohy,DMD)进行基因治疗奠定基础.方法 用Not Ⅰ酶切含microdystrophin基因的pBSK-MICRO质粒,获得microdystrophin基因.片段回收后定向插入真核表达质粒pVAX1,获得重组质粒pAMICDYS.然后将重组质粒pAMICDYS转染小鼠成纤维细胞3T3细胞,通过逆转录-PCR以及间接免疫荧光检测microdystrophin的转录及蛋白表达;最后将重组质粒pAMICDYS通过肌肉注射到DMD模型鼠胫前肌中,检测治疗肌肉的病理变化和microdystrophin的表达情况.结果 成功构建了含有microdystrophin基因的重组质粒,并在体外得到了很好表达,体内研究表明microdystrophin基因在mdx鼠TA也有一定程度的表达,而且减少了所治疗肌肉的核中移数量,证实了其对mdx鼠有一定的治疗作用.结论 该重组质粒的构建及体内、外得到成功表达,为下一步用该质粒进行电转、静脉、动脉注射或加入其它基因来增强microdystrophin基因的表达来治疗DMD疾病奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖少波	华中农业大学农幢微生物国家重点实验室	79	1105	19.0	30.0
2	张成	中山大学附属第一医院神经内科	219	968	12.0	19.0
6	郑卉	中山大学附属第一医院神经内科	1	0	0.0	0.0
7	于美娟	中山大学附属第一医院干细胞与组织工程研究中心	12	39	4.0	5.0
8	许勇峰	中山大学附属第一医院神经内科	3	23	2.0	3.0
9	刘正山	中山大学附属第一医院干细胞与组织工程研究中心	4	18	1.0	4.0
10	周畅	中山大学附属第一医院神经内科	9	53	4.0	7.0