正交设计在实时定量PCR检测条件优化中的应用

• 作者: 孙俊红 杜秋香 王小伟 王英元
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医病理学 正交设计 实时定量PCR 皮肤损伤 ICAM-1
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 技术交流
• 页码范围: 111-114
• 页数: 4页
• 分类号: D9
• 字数: 2325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5728.2008.02.012

摘要

目的 探索正交设计在实时定量PCR检测条件优化中的应用,找出扩增ICAM-1基因的最佳条件.方法 建立大鼠皮肤损伤模型,采用正交设计实时定量PCR的各影响条件,提取损伤处皮肤组织总RNA反转录成cDNA,cDNA作为模板,通过特异性引物扩增ICAM-1基因.对扩增曲线和融解曲线制定评分标准,量化不同实验条件下的扩增结果并进行统计分析.结果 退火温度、模板量和引物浓度直接影响扩增效果,但三因素间无相互作用.结果 经统计学分析表明退火温度61℃、模板cDNA用量0.4μg和引物终浓度150μmol/L为实时定量PCR检测ICAM-1基因的最佳条件组合.结论 正交设计是一种切实可行、快速经济的实时定量PCR检测条件优化方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙俊红	山西医科大学法医学院法医病理学教研室	68	201	7.0	9.0
2	王英元	山西医科大学法医学院法医病理学教研室	165	902	15.0	21.0
3	杜秋香	山西医科大学法医学院法医病理学教研室	32	97	6.0	7.0
4	王小伟	山西医科大学法医学院法医病理学教研室	8	28	4.0	5.0