多抗PVY、TMV和CMV转基因烟草的培育

• 作者: 宋云枝 朱常香 温孚江
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 马铃薯Y病毒 黄瓜花叶病毒 烟草花叶病毒 转基因烟草 多病毒抗性
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 1040-1047
• 页数: 8页
• 分类号: S4
• 字数: 6440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.04.013

摘要

[目的]利用RNA介导抗性培育抗多种植物病毒的转基因烟草.[方法]分别以马铃薯Y病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)全长衣壳蛋白(CP)基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得PVY CP 3'端长度100bp、TMV CP 3'端长度100bp和CMV CP 3'端长度200bp的cDNA片段并拼接成嵌合基因,并以此为模板构建反向重复结构嵌合基因的植物表达载体pRHPTC.将pRHPTC通过冻融法导入农杆菌LBA4404,采用叶盘法转化烟草NC89,然后测定转基因烟草对3种病毒的抗性.[结果]经卡那霉素筛选和PCR检测,共获得276株转基因烟草.Southern和Northern blot分析表明,外源基因以不同拷贝数整合于烟草基因组中;不同转基因植株中病毒RNA的积累量存在显著差异.抗病性检测显示:23%左右的转基因植株表现出对3种病毒侵染的抗性.对转基因植株扩繁后代和T1代的抗性分析表明:多病毒抗性表现稳定.[结论]利用RNA介导的抗病毒基因工程可获得同时抗多种病毒的转基因烟草,其抗病性在T0代扩繁植株和T1代植株中得到稳定遗传.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱常香	山东农业大学生命科学学院	57	1480	23.0	37.0
3	宋云枝	山东农业大学生命科学学院	33	908	17.0	30.0
9	温孚江		1	47	1.0	1.0