Ad-vcam-1-gfP重组腺病毒转染人脐血源基质细胞的实验研究

• 作者: 刘耀 司英健 张曦 彭贤贵 王庆余 陈幸华 高力 高蕾
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: vcam-1 CBDSC GFP 重组腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 造血微环境
• 页码范围: 598-604
• 页数: 7页
• 分类号: Q78|Q754
• 字数: 6521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2008.03.030

摘要

本研究探讨血管细胞黏附分子(vcam-1)修饰的人脐血源基质细胞(human umbilical cord blood derived strom cells,CBDSC)在造血调控中的作用.采用DNA重组技术,将目的基因vcam-1克隆至含有报告基因gfp的穿梭质粒;在BJ5183细胞中与pAdeasy-1质粒进行同源重组,产生重组腺病毒载体转染人脐血源基质细胞并进行鉴定.结果表明:vcam-1基因与pAdTrack-CMV载体成功连接,经Not Ⅰ/Xho Ⅰ双酶切后电泳可见2个大小约为9kb和2 kb左右条带,经PCR法扩增后电泳可见1个600 bp左右条带,证明pAdTrack-CMV-vcam-1重组质粒构建成功.pAdTrack-CMV-vcam-1质粒与pAdeasy-1质粒同源重组后,产物经PAC Ⅰ酶切后电泳可观察到2个大小约为31 kb、4 kb左右条带,与预期结果相符.腺病毒载体转染人脐血源基质细胞后免疫化学、RT-PCR、荧光显微镜等方法均检测到目的基因vcam-1的表达.结论:构建ad-vcam-1-gfp重组腺病毒载体可成功转染人脐血源基质细胞并使其vcam-1表达增高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈幸华	第三军医大学新桥医院血液科	211	763	12.0	16.0
2	彭贤贵	第三军医大学新桥医院血液科	81	282	8.0	11.0
3	王庆余	第三军医大学新桥医院血液科	66	291	6.0	14.0
4	张曦	第三军医大学新桥医院血液科	185	637	11.0	14.0
5	高蕾	第三军医大学新桥医院血液科	78	269	7.0	10.0
6	刘耀	第三军医大学新桥医院血液科	35	199	8.0	12.0
7	高力	第三军医大学新桥医院血液科	37	122	6.0	7.0
8	司英健	第三军医大学新桥医院血液科	10	77	4.0	8.0