利用磁珠构建稻瘟菌cDNA文库

• 作者: 徐锋 武晓丽 邱德文
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 稻瘟菌 cDNA文库 磁珠
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 方法
• 页码范围: 806-810
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 4410字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2008.06.017

摘要

本文以稻瘟菌菌丝体为材料提取RNA,[目的]改进张学敏等人的方法,通过磁珠构建稻瘟菌cDNA文库,并用于下一步研究稻瘟菌与水稻之间的互作关系.[方法]通过共价键连接的寡聚oligo(dT)磁珠纯化mRNA,并以磁珠上的oligo(dT)为引物引导第一链cDNA的合成,再利用末端转移酶加尾法合成第二链cDNA.构建过程中避免使用限制酶和连接接头.[结果]用此方法构建的文库容量为8.9×107cfu,滴度为8.9×106 cfu/mL,随机挑取的25个克隆插入片断平均大小达到1380bp.[结论]实验结果表明用改进的方法可构建高质量的cDNA文库,并且方便快捷,所用材料少,构建时间短,利于大规模的功能基因分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱德文	中国农业科学院植物保护研究所	104	1657	20.0	38.0
2	徐锋	长江大学生命科学学院	4	23	3.0	4.0
4	武晓丽	中国农业科学院植物保护研究所	7	14	2.0	3.0