表达猪流行性腹泻病毒COE基因的重组乳酸菌的构建与鉴定

• 作者: 姜海龙 胡桂学 董丽娜 许崇波 高凤山
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: PEDV COE基因 克隆 乳酸乳球菌 表达
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1743-1747
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.6
• 字数: 3640字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.12.018

摘要

用疑似患猪流行性腹泻病(PED)的病猪肠病料,根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)S糖蛋白基因设计引物进行RT-PCR扩增,获得531 bp的PEDV部分保护性抗原基因,将其克隆入pMD18-T载体后测序,核苷酸序列与PEDV CV777株相应序列的同源性为99.4%.根据测序结果和表达载体特点,设计一对引物,扩增PEDV部分保护性抗原基因(COE基因)501 bp片段.将COE基因与乳酸乳球菌表面表达载体pNZ8149进行连接,电击转化人食品级乳酸乳球菌NZ3900细胞.重组菌以1 ng/mL乳链菌肽(Nisin)诱导,通过SDS-PAGE和Western blot分析,PEDV部分S蛋白成功表达,并具有反应原性.间接免疫荧光试验表明,重组菌表达蛋白定位于菌体细胞表面.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡桂学	吉林农业大学动物科学技术学院	185	837	15.0	21.0
2	许崇波	大连大学生物工程学院	70	565	12.0	20.0
3	高凤山	大连大学生物工程学院	60	358	10.0	16.0
4	姜海龙	吉林农业大学动物科学技术学院	91	473	11.0	19.0
5	董丽娜	吉林农业大学动物科学技术学院	5	90	3.0	5.0