猪流行性腹泻病毒coe基因的克隆表达及卵黄抗体的制备

• 作者: 刘慧敏 周国丽 尹志安 常琛 朱文姣 朱玉虎 杨国庆
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻 COE蛋白 卵黄抗体
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧与兽医科学
• 页码范围: 560-565
• 页数: 6页
• 分类号: S855
• 字数: 3924字
• 语种: 中文

摘要

通过RT-PCR技术扩增猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)coe基因,将其克隆至原核表达载体pET32a中,构建重组表达质粒pET32a-coe,鉴定正确后进行诱导表达.结果表明,重组菌可表达相对分子量约为33 kD的融合蛋白;Western-Blotting结果显示,COE蛋白能与抗PEDV的阳性血清发生特异性结合反应,表明研究的COE蛋白具有良好的反应原性.纯化后的COE蛋白与弗氏佐剂按比率混合作为免疫抗原,免疫产蛋鸡,获得特异性抗猪流性腹泻病毒COE蛋白的卵黄抗体(IgY).氯仿抽提法提取卵黄抗体,通过SDS-PAGE、Western-Blotting对提取的卵黄抗体进行鉴定并用间接酶联免疫吸附实验(ELISA)对其进行效价检测.结果显示,纯化后的卵黄抗体IgY具有高度的特异性,其抗体效价可达1:1000.研究结果表明,表达的COE蛋白具有良好的免疫原性,作为免疫抗原制备的卵黄抗体具有较高的抗体效价.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘慧敏	河南农业大学生命科学学院	23	43	4.0	5.0
2	杨国庆	河南农业大学生命科学学院	13	54	3.0	7.0
3	朱文姣	河南农业大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0
4	常琛	河南农业大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
5	周国丽	河南农业大学生命科学学院	4	6	2.0	2.0
6	尹志安	河南农业大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0