小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其诱导小鼠和鹅中和抗体的初报

• 作者: 刘晓东 卢菲 汪铭书 程安春 车茜 韩新锋 黎敏
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 工学
• 关键词: 小鹅瘟病毒 VP3基因 真核表达质粒 基因免疫 中和抗体
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 资源环境与生物技术
• 页码范围: 543-549
• 页数: 7页
• 分类号: TP3
• 字数: 6569字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3772/j.issn.1002-0470.2008.05.018

摘要

PER扩增小鹅瘟病毒(IHPV)CHv株VP3基因并克隆入pMD 18-T-Simple载体,亚克隆正向插入到真核表达质粒pcDNA3.1(+)CMV启动子下游多克隆位点,经PCR和HindⅢ与BamH Ⅰ双酶切鉴定表明成功构建了GPV VP3基因疫苗(pcDNA3.1-GPV-VP3).该疫苗以200μg/只肌注免疫Balb/c小鼠和鹅,同时分别设肌注PBS和pcDNA3.1(+)作为对照,于免疫后第30、45、60、75、90、105天应用鸭胚原代成纤维细胞(DEF)进行微量中和试验检测小鼠和鹅血清抗100 TCID50 GPV的抗体效价.结果表明,pcDNA3.1.GPV-VP3免疫小鼠第30天可检测到抗GPV的中和抗体,抗体效价缓慢上升至90天达到高峰(平均1:135.8)后下降,105天仍高于75天;免疫鹅的中和抗体效价呈现与小鼠类似的规律,第90天达到高峰(平均1:98.5).因此,peDNA3.1-GPV-VP3具有良好的免疫原性,肌注免疫小鼠和鹅后能够诱发产生抗GPV的中和抗体,有进一步开展临床研究和应用的前景.