利用正交设计优化异色瓢虫SRAP-PCR反应体系

• 作者: 关桦楠 宇佳 董婧 迟德富
• 来源期刊: 昆虫知识
• 学科: 生物学
• 关键词: 异色瓢虫 SRAP 正交设计 分子标记 天敌昆虫
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 156-161
• 页数: 6页
• 分类号: Q96
• 字数: 4408字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0452-8255.2008.01.036

摘要

利用正交设计L16(45)对异色瓢虫Harmonia axyridis(Pallas)SRAP-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物)在4个水平上进行优化试验,试验结果用DPS和MINITAB软件进行分析,建立了异色瓢虫SRAP-PCR反应的最佳体系,即在20 μL体系中模板50～100 ng、引物0.25μmol/L、dNTPs 0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5U、Mg2+ 0.375～0.625 mmol/L.并对反应体系进行梯度退火试验,得到最佳退火温度为50.3℃.这一优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行瓢虫遗传图谱的构建、多态性分析和基因定位奠定了技术基础.