旱柳SRAP-PCR体系的建立与优化

• 作者: 张珏 教忠意 王红玲 隋德宗
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 林木育种学 旱柳 相关序列扩增多态性(SRAP) 正交实验设计
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 945-949
• 分类号: S722.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2010.06.024

摘要

为了丰富柳树分子标记的手段,以旱柳Salix matsudana为材料,通过正交实验设计法,获得适于旱柳的相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)-聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系;对SRAP-PCR扩增过程中的2次退火温度进行优化.结果如下:优化反应体系.25.00 μL反应液中,含20.84 nkat的Tap酶,2.00 μL Mg2+(25.00 mmol·L-1).2.50μL碱基混合物(脱氧核糖核苷酸dNTPs,各2.50 mmol·L-1),1.50μL引物(20.00 μmol·L-1),100.00 ng DNA模板.2.50μL 10×Tap酶缓冲液.扩增程序,94℃2.0 min;94℃1.0 min,38℃1.0 min,72 ℃ 1.5 min.5个循环;94℃1.0min,54℃1.0 min,72℃1.5 min,30个循环:72 ℃ 10.0 min.经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测,特征性条带清晰,信息量大,完全可以用于旱柳基因组的研究分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	教忠意		45	514	11.0	21.0
2	隋德宗		21	205	10.0	14.0
3	张珏		16	138	6.0	11.0
4	王红玲		13	43	4.0	6.0