春兰SRAP-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 包建忠 孙叶 李风童 袁媛 陈秀兰
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 春兰 SRAP-PCR 正交试验设计 体系优化
• 年，卷（期）: 2018,（17）
• 所属期刊栏目: 动物科学·生物技术
• 页码范围: 105-107
• 页数: 3页
• 分类号: S682.31
• 字数: 2035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2018.17.031

摘要

[目的]构建适合春兰SRAP-PCR反应的最佳体系.[方法]对影响PCR反应的5个变量(dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度、Taq酶量、模板DNA用量)采用L16(45)正交试验设计,建立春兰SRAP-PCR最适反应体系.[结果]最佳优化体系为0.25 mmol/L dNTPs、2.50 mmol/L Mg2+、0.80 μmoL/L引物、1.00U Taq酶、200.00 ng模板DNA,共20μL.扩增程序:94℃预变性4min,反应前5个循环在94℃变性1 min、35℃复性1min、72℃延伸1min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高至50℃,最后72℃延伸10 min.[结论]该体系有利于SRAP分子标记在春兰材料上的应用,为春兰分子遗传育种奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈秀兰		138	768	16.0	21.0
2	孙叶		49	312	11.0	15.0
3	包建忠		79	401	12.0	16.0
4	李风童		34	202	8.0	12.0
5	袁媛		7	23	2.0	4.0