剑豆 SRAP-PCR 反应体系的建立及优化

• 作者: 丁美美 刘明骞 欧阳昆唏 陈丽君 陈晓阳
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 剑豆 SRAP-PCR 均匀设计 优化
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 75-78
• 页数: 4页
• 分类号: S643.2
• 字数: 2318字
• 语种: 中文

摘要

目的建立和优化剑豆Canavalia ensiformis的SRAP-PCR体系，为分析剑豆遗传多样性和建立遗传图谱打下基础．方法首先用单因素试验法对SRAP-PCR反应体系的5个主要影响因素（ Mg2＋、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA）各设8个浓度梯度进行试验，找到5个因素的适宜浓度范围，再采用均匀设计法进行5因素4水平和5因素3水平的2轮优化．结果和结论建立了剑豆SRAP-PCR最佳反应体系（25μL）： Mg2＋1.75 mmol／L， dNTPs 200μmol／L，引物0.36μmol／L，Taq DNA聚合酶0.06 U／μL，模板DNA 40 ng．所建立的体系稳定可靠，适用于剑豆后续的SRAP分析．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈丽君	华南农业大学教学科研基地管理中心	5	4	1.0	2.0