油茶DNA提取及RAPD分析最佳反应体系的建立

• 作者: 张芳 阙生全
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 油茶 RAPD分析 最佳反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 902-903,905
• 页数: 3页
• 分类号: Q503
• 字数: 2792字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.03.030

摘要

[目的]为建立油茶RAPD分析的最佳反应体系.[方法]分别用改良SDS法和CTAB法从12个油茶品种的新鲜幼叶中提取基因组DNA.通过测定OD260和OD280来比较两种方法提取DNA的纯度.建立油茶的RAPD反应程序,通过优化反应条件获得油茶RAPD分析的最佳反应体系.[结果]CTAB法提取的油茶基因组DNA纯度高于SDS法.油茶RAPD分析的最佳反应体系为:1.0 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L MgCl2、200 μmol/L dNTP、10 pmol/L随机引物、20 ng DNA模板、2 μl 10×PCR buffer,加重蒸水至20 μl.油茶的RAPD反应程序为:95 ℃预变性3 min;94 ℃变性1 min,40 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40循环;72 ℃延伸7 min.[结论]该研究所用DNA纯度较高,反应条件控制严格,试验中扩增稳定性较好,是适合油茶RAPD分析的最佳反应体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阙生全	南昌理工学院生环系	6	55	5.0	6.0
2	张芳	南昌理工学院生环系	5	38	4.0	5.0