何首乌cDNA文库的构建及分析

• 作者: 严萍 申彦晶 谭雪梅 赵树进 郑传进
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: cDNA文库 何首乌 次生代谢产物
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 1716-1720
• 页数: 5页
• 分类号: R282.1
• 字数: 4390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-2670.2008.11.038

摘要

目的 为进行药用植物次生代谢产物的生物合成基因调控研究,构建了三年生何首乌叶cDNA文库.方法 以何首乌成熟叶片为材料提取其总RNA;纯化出mRNA;反转录合成双链cDNA;钝化cDNA末端;连接上EcoR Ⅰ接头;经Xho Ⅰ酶切后,使用Sepharose CL-2B凝胶介质滤过,收集400 bp以上的片段与Uni-ZAP XR载体连接,经包装蛋白包装成cDNA文库.Uni-ZAP XR载体可以在辅助噬菌体ExAssist helper phage的共感染下,快速释放出pBluescript SK-噬菌粒.经转染E.coli SOLR后,铺于氨苄青霉素抗性平板.分别利用PCR和双酶切的方法鉴定插入片段的大小.结果 测定该初始文库的滴度为1.07×106pfu/mL,含有5.4×105个重组子,插入片断长度为0.5～2.0 kb;扩增文库的重组子为4.25×1011个,重组率为98.5%.结论 经检测所构建的文库库容量满足基因筛选要求,为进行中药材相关功能基因调控研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵树进		271	2349	23.0	37.0
2	申彦晶		6	56	5.0	6.0
3	严萍		14	105	6.0	9.0
4	谭雪梅		3	31	2.0	3.0
5	郑传进		1	2	1.0	1.0