融合蛋白VacA-HpaA卵黄抗体的体外研究

• 作者: 叶翠莲 张吉 杨致邦 黄进
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 IgY 细胞空泡毒素 粘附素 体外试验 中和作用
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 分子细胞免疫学
• 页码范围: 114-118
• 页数: 5页
• 分类号: R378.2
• 字数: 4806字
• 语种: 中文

摘要

目的:研究VacA-HpaA融合蛋白的鸡卵黄抗体(IgY)的理化特性和生物学活性,为制备集预防与治疗为一体的抗H.pylori感染的制剂奠定基础.方法:以纯化的VacA-HpaA融合蛋白免疫产蛋鸡,水稀释法获取蛋黄抗体(VacA-HpaA IgY).(1)用硫酸铵沉淀法纯化IgY后,用SDS-PAGE分析其纯度,Bradford法测定蛋白含量.(2)用间接ELISA法检测该IgY的耐热性、耐酸性及其对酶消化的耐受作用.(3)采用Western blot分析IgY的特异性并检测其效价.(4)用MTT法检测不同浓度VacA-HpaAIgY对细胞毒活性的中和作用.(5)用扫描电镜观察VacA-HpaA IgY对AGS细胞粘附的中和作用.结果:(1)该IgY 纯度为60%,蛋白浓度为22 g/L;(2)具有一定的耐热性、耐酸性和耐胃蛋白酶能力;(3)Western blot分析显示IgY的特异性,在相对分子量约27 000和30 000处出现在相应的条带;(4)该IgY对VacA细胞毒活性有中和作用,且具有量效性和时效性;(5)IgY可阻止H.pylori菌体蛋白的粘附作用.结论:该IgY具有良好的理化和生物学特性,可用于制备抗H.pylori感染的防治制剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨致邦	重庆医科大学病原生物学教研室	119	522	12.0	17.0
2	张吉	重庆医科大学病原生物学教研室	7	127	5.0	7.0
3	黄进	重庆医科大学病原生物学教研室	11	36	4.0	5.0
4	叶翠莲	重庆工学院生物工程学院	2	8	2.0	2.0