非洲猪瘟病毒p30蛋白卵黄抗体的制备及生物活性检测

• 作者: 张皓淳
• 来源期刊: 国外畜牧学猪与禽
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 抗原蛋白 卵黄抗体 生物活性 IgY
• 年，卷（期）: 2023,（1）
• 所属期刊栏目: 猪业篇目次 试验研究
• 页码范围: 32-36
• 页数: 4页
• 分类号: S852.4+3
• 语种: 中文

摘要

为了制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)p30蛋白卵黄抗体，研究卵黄抗体的生物活性。试验构建了pET-32a-p30原核表达载体，制定了科学的免疫程序和样本采集方法。提取卵黄液，进行二次盐析，得到对应的卵黄抗体。用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)测定卵黄抗体效价，用免疫印迹（Western blotting）技术对其生物活性进行鉴定。ELISA试验表明：首次免疫p30蛋白7d后，能够在蛋鸡的血清中检测出抗体（IgY），14d后在卵黄中能够提取到IgY，35d后IgY效价达到最高值。IgY具备和哺乳动物产生的IgY不同的生物活性，并可具有较高的特异性和稳定性，在免疫学研究中具有重要的价值。利用IgY进行实验检测，具有突出优势。通过抗原即ASFVp30蛋白免疫蛋鸡，分离提纯免疫蛋白，检测其生物活性，可用于鉴定非洲猪瘟。