PTTG靶向siRNA表达载体构建及其沉默效率评价

• 作者: 于洪泉 夏常丽 康淑红 徐松柏 许侃 赵刚 赵红光
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi 垂体肿瘤转化基因 神经胶质瘤 siRNA
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 411-414
• 页数: 4页
• 分类号: R739.4
• 字数: 3214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2008.03.014

摘要

目的:构建针对人脑胶质瘤细胞系U251的高效率沉默垂体瘤转化基因(PTTG)的小分子干扰RNA(siRNA)表达载体.方法:合成特异性干扰PTTG的siRNA片段,并与pGenesi12载体连接,构建PTTG干扰载体(pGenesi12-PTTG siRNA).利用脂质体将其转染U251细胞,分为正常细胞对照组、HK阴性对照组和3个siRNA干扰组(pGenesi12-PTTG siRNA1、pGenesi12-PTTG siRNA2和pGenesi12-PTTG siRNA3),应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法和流式细胞术对转染后U251细胞中PTTG的mRNA和蛋白表达水平进行分析.结果:酶切证实PTTG-siRNA表达载体构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致;转染pGenesi12-PTTG siRNA后,3个干扰组的U251细胞中PTTG基因和蛋白表达水平均较正常对照组显著降低(P<0.01).结论:成功构建了能高效率沉默PTTG的RNAi表达载体;pGenesi12-PTTG siRNA高效地抑制了胶质瘤U251细胞中PTTG基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵刚	吉林大学第一医院神经外科	211	937	13.0	19.0
2	于洪泉	吉林大学第一医院神经外科	67	256	8.0	11.0
3	许侃	吉林大学第一医院神经外科	54	200	8.0	10.0
4	徐松柏	吉林大学第一医院神经外科	34	115	6.0	8.0
5	赵红光	吉林大学第一医院核医学科	48	303	10.0	15.0
6	康淑红	吉林大学第一医院核医学科	8	46	4.0	6.0
7	夏常丽	吉林大学基础医学院人体解剖学教研室	1	2	1.0	1.0