猪α干扰素在大肠杆菌中的表达及抗病毒活性检测

• 作者: 刘占通 宋凌云 崔保安 张素梅 金喜新 陈红英
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪α干扰素}原核表达 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 动物医学
• 页码范围: 42-46
• 页数: 5页
• 分类号: S851.31
• 字数: 3663字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2008.04.008

摘要

[目的]利用基因工程技术寻求能够高效、稳定表达猪α干扰素,且表达产物易于纯化的表达系统.[方法]以含猪α干扰素(IFN-α)基因的重组质粒pGEM-T-IFN-α为模板,PCR扩增猪α干扰素基因.将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-IFN-α,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-α).[结果]SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为45 ku的GST-IFN-α,Westernblot证实GST-IFN-α能与猪IFN-α单克隆抗体发生特异性反应.重组猪α干扰素经谷胱苷肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,在Vero细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为2.24×103U/mg.[结论]建立的表达系统能够表达重组猪α干扰素,表达的重组猪α干扰素具有一定的生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张素梅	河南农业大学牧医工程学院	110	653	14.0	21.0
2	陈红英	河南农业大学牧医工程学院	168	646	12.0	16.0
3	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
4	刘占通		24	109	7.0	9.0
5	金喜新		27	109	6.0	10.0
6	宋凌云	河南农业大学牧医工程学院	4	53	3.0	4.0