少突胶质细胞祖细胞高效分离培养及EGFP基因转染

• 作者: 严稽文 张伟 杨辉 阴金波 陈焕然 马玉新 黄其林
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 少突胶质细胞祖细胞 细胞培养 增强型绿色荧光蛋白 基因转染
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-7,封4
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.11|R651
• 字数: 3110字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2008.01.002

摘要

目的:建立高效分离少突胶质细胞祖细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的方法,并转染增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因.方法:采用2次接种培养和差速振荡分离,结合使用神经营养因子(bFGF、PDGF-AA),体外分离纯化和扩增培养OPCs,用抗A2B5、GFAP、CNPase免疫荧光抗体鉴定细胞类型.采用脂质体介导EGFP基因转染OPCs,筛选获得稳定表达EGFP的OPCs细胞.结果:分离培养的OPCs细胞呈A2B5阳性,纯度达到99%,具有增殖和双向分化的潜能(GFAP阳性的2型星形胶质细胞和CNPase阳性的少突胶质细胞),传代培养1个月仍具有增殖能力.EGFP基因转染后OPCs细胞能发出绿色荧光,并继续保持增殖分化特性.结论: 二次接种培养和差速振荡分离法可获得高纯度OPCs细胞;EGFP基因转染可作为示踪OPCs迁移的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄其林	第三军医大学新桥医院神经外科	63	309	10.0	14.0
2	杨辉	第三军医大学新桥医院神经外科	178	791	12.0	19.0
3	张伟	第三军医大学新桥医院神经外科	86	588	11.0	20.0
4	马玉新	第三军医大学新桥医院神经外科	8	2	1.0	1.0
5	阴金波	第三军医大学新桥医院神经外科	22	45	4.0	5.0
6	严稽文	第三军医大学新桥医院神经外科	9	30	4.0	5.0
7	陈焕然	第三军医大学新桥医院神经外科	6	32	2.0	5.0