基孔肯雅病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究

• 作者: 师永霞 幸芦琴 李小波 洪烨 相大鹏 郑夔 郭波旋 钟玉清 黄吉城
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 基孔肯雅病毒 实时荧光PCR 检测
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1721-1723
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2008.09.006

摘要

目的:建立基孔肯雅病毒的荧光定量PCR检测方法.方法:人工合成基孔肯雅病毒部分有代表性的序列核酸作为阳性对照模板,设计几组实时荧光PCR引物、探针及反应体系,摸索出最佳反应体系条件.结果:建立的基孔肯雅病毒的实时荧光PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CHIK-FP终浓度500 nM,反向引物CHIK-RP终浓度1000 nM,探针CHIK-Probe终浓度250 nM;扩增程序为:50℃10 min,95℃ 10 min,95℃10 s→62℃30 S 45次循环.结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于基孔肯雅病毒的快速检验.